伴随着高温环境,左旋 DNA 也会发生变性变成单链,使得荧光报告基团和淬灭基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号。通过分析荧光信号的累积速度,研究人员可以确定所有双链分离的精确时间点。
同时,我们还需要合成左旋引物(标记有荧光淬灭基团)。当 PCR 反应进行至退火步骤,引物会与左旋 DNA 单链集合,其淬灭基团会抑制荧光信号。这时候,荧光信号又会发生变化,从而便于研究人员分析引物与所有 DNA 单链结合的时间点。
值得注意的是,左旋 DNA 的量并不会改变,因为它不参与扩增步骤。
研究人员表示,这一适应性 PCR 技术可以弥补传统 PCR 仪器的局限性,它可以让基于 PCR 的诊断有机会脱离实验室环境,例如样本制备的高标准、反应温度的严密控制。